I campioni di sangue intero sono fondamentali per la previsione e la diagnosi delle malattie. Un DNA genomico (gDNA) intatto, di alta qualità e concentrato da sangue intero è un passaggio critico per le applicazioni di ricerca a valle come qPCR, microarray e sequenziamento di nuova generazione (Next-Generation Sequencing, NGS). Il termine biobanca si riferisce a un grande raccolta di campioni di tessuti come sangue e siero, prelevati a scopo di ricerca. Per accedere a grandi quantità di campioni umani e dati, un numero crescente di ricercatori sta cercando di accedere ai campioni disponibili attraverso le biobanche. Qui presentiamo un metodo di estrazione del DNA di alta qualità, pronto per la ricerca, da grandi volumi di sangue intero con GenFind V3.

Protocollo:

Estrazione del DNA da un massimo di 2 ml di sangue con GenFind V3

Estrazione del DNA da un massimo di 2 ml di sangue prelevato in provette con EDTA, eparina e citrato utilizzando GenFind V3

L’isolamento del DNA genomico da 2 ml di sangue intero congelato è stato dimostrato isolando il DNA da quattro donatori sani. Il sangue è stato prelevato in tre provette per la raccolta del sangue che contenevano i seguenti conservanti: EDTA, eparina e citrato. Il rendimento e la purezza del DNA sono stati valutati con NanoDrop (Thermo Fisher Scientific). Il rendimento medio del DNA era di 33 μg per le provette di prelievo con EDTA, 25 µg per le provette con eparina e 23 µg per le provette con citrato (Figura 1).

Il rapporto di purezza medio A260/A280 era 1,7 per tutte le provette di prelievo (Figura 2).

Il rapporto di purezza medio A260/A230 era 1,9 per tutte le provette di prelievo (Figura 3).

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