Protocollo marcatura per saggio di attivazione delle mieloidi
Questo protocollo è da considerarsi solo orientativo. Per esigenze specifiche, potrebbe essere necessario adattare il metodo .
Materiali
IOTest Myeloid Activation CD169-PE/HLA-DR-APC/CD64-PB Antibody Cocktail, Articolo C63854
MATERIALI RICHIESTI E NON FORNITI
Provette per la raccolta di sangue intero con anticoagulante EDTA o eparina
Provette 12 x 75 mm (Articolo 2523749)
Pipettatori e puntali per pipette in grado di erogare 10 e 500 µL
VersaLyse Solution (Articolo IM3648)
IOTest 3 Fixative Solution, concentrata 10X (Articolo IM3515)
VersaLyse/Fixative:
Dilute IOTest 3 Fixative Solution 1:220 in VersaLyse Solution
Attivatori usati per il controllo positivo
Citofluorimetro
Procedura di staining
- Aggiungere da 5 a 25 μL di sangue intero alla provetta.
- Aggiungere 10 μL del cocktail IOTest CD169-PE/ HLA-DR-APC/ CD64-PB.
- Aggiungere 500 μL di VersaLyse/Fixative.
- Incubare 10 minuti.
- Acquisire i dati al citofluorimetro.
Nota: Per il sangue anti-coagulato con eparina, i campioni marcati possono essere acquisiti fino a 6 ore. Per il sangue anti-coagulato con EDTA, i campioni marcati possono essere acquisiti fino a 3 ore.
Vedi esempio di dati
