Requisiti della camera bianca per test delle particelle liquide

Le particelle contaminanti nelle terapie farmacologiche iniettabili o di infusione possono essere microbiologiche con conseguente infezione, reazione allergica o, in casi estremi, shock anafilattico. Con la sicurezza del paziente in gioco, le linee guida di buona pratica di fabbricazione (Good Manufacturing Practice, GMP) richiedono che le iniezioni e le infusioni vengano prodotte in un ambiente controllato per contenere qualsiasi rischio di contaminazione del prodotto dovuta al particolato aereo.

Questo stesso rischio esiste quando si testano i livelli di particolato nel prodotto finale. L’USP capitolo <787> raccomanda di eseguire test delle particelle liquide in un ambiente controllato per ridurre il rischio di contaminazione durante il test del campione e per aiutare a prevenire “falsi positivi” che possono accadere nel caso in cui le particelle vengano introdotte nel prodotto farmaceutico durante la fase di test. La protezione del campione durante i test è fondamentale per evitare un costoso evento di contaminazione che potrebbe impedire il rilascio dell’intero lotto. Ulteriori informazioni sul test delle particelle per oscuramento della luce secondo quanto stabilito in USP <787>.

Classificazione del particolato

Complessivamente, qualsiasi materiale da semi-solido a solido può essere conteggiato e considerato pericoloso all’atto dell’identificazione. Gli esempi includono aria, liquido, gel, solido singolo, aggregato, agglomerato, solido farmaceutico, sale, polimorfo, lubrificante e plastificante.

I tipi comuni di particolato sono estrinsechi, intrinsechi e inerenti.

USP capitolo <787> consente la presenza di particelle proteiche insolubili come parte intrinseca delle terapie a base di proteine, etichettandole come particelle inerenti. Lo standard fornisce una chiara distinzione tra particelle proteiche inerenti e particelle “contaminanti” che non devono essere presenti. Per garantire che il prodotto finale sia conforme ai limiti di particelle ammissibili, è essenziale comprendere l’identificazione, l’origine e la caratterizzazione del particolato.

USP <787> richiede ai produttori di eseguire test per particelle con dimensioni ≥10 micron e ≥25 micron. Le particelle proteiche inerenti si trovano tipicamente nell’intervallo di dimensioni inferiori al micron o nanometriche e pertanto non vengono rilevate dai test. Tuttavia, le proteine tendono a “piegarsi” o aggregarsi nel tempo formando particelle abbastanza grandi da influire su un risultato positivo/negativo. L’aggregazione proteica è indesiderabile in quanto causa l’occlusione della parte terapeutica della proteina, rendendola meno efficace per i pazienti.

Preparazione del campione per la formulazione a base di proteine

  • Creare un leggero vuoto sul materiale per eliminare il gas inseritosi
    • Evitare la sonicazione quando si lavora con le proteine
  • Si raccomanda di non invertire mai la miscelazione del prodotto
    • Miscelate nuovamente con delicatezza; agitate lentamente il contenitore a mano
  • La diluizione deve essere eseguita attentamente per evitare la dissociazione e/o l’aggregazione
    • La ricostituzione deve essere eseguita con una quantità adeguata di solvente specifico.
    • Il solvente stesso deve essere testato per assicurarsi che non sia una fonte di particelle. NOTA: Non è consentito sottrarre il conteggio del diluente dal conteggio totale

USP <787> e la preparazione del sistema di oscuramento della luce

Quando si lavora con un contatore a oscuramento della luce, eseguire un paio di soluzioni di test per verificare che il sistema funzioni correttamente. Prendere in considerazione la possibilità di svolgere questi controlli di salute al cambio turno, al cambio di operatore o ad altri intervalli definiti.

  • Test vuoto 1 (acqua “senza particelle”)
  • Idoneità del sistema per il test dei materiali
    • Standard di riferimento nel conteggio di particelle o USP PCRS (materiale di quantità nota in dimensioni specifiche)
    • o alternativa adeguata

Volumi di test e campionamento

USP <787> affronta anche il volume delle iniezioni, che in genere sono più piccole di quelle dei prodotti farmaceutici con molecole piccole. Il requisito USP <788> per volume di campione del lotto (25,0 ml) pone un obbligo di test impegnativo e costoso per le terapie a base di proteine. Con <787>, i produttori possono testare volumi di campioni da 0,2 ml e 5,0 ml a condizione che venga fornita una serie di prove e che il campione testato sia una buona rappresentazione statistica del lotto prodotto.

Contenuto totale di particelle: Limitato a 6.000 particelle

Soglie delle dimensioni delle particelle: Limiti simili a quelli USP <787>/<788> di ≥10 μm e 600 particelle ≥ 25 μm (tutti i formati di dosaggio)

USP <787> raccomanda che le popolazioni al di sotto dei 10 μm vengano monitorate regolarmente per caratterizzare la stabilità della formulazione del farmaco finale.

USP <787> incoraggia i produttori di terapie a base di proteine a eseguire il test delle particelle con un contatore di particelle a oscuramento di luce e tecniche ortogonali2 per rivelare meglio la struttura e la stabilità del dato biologico nel tempo. Sebbene si tratti della tecnica principale, non tutte le preparazioni possono essere esaminate per particelle subvisibili mediante oscuramento della luce.

2Per valutare/convalidare il metodo primario si può utilizzare un metodo ortogonale. Ad esempio: per studiare l’aggregato proteico si possono utilizzare due metodi. Metodo 1: cromatografo/ortogonale di esclusione dimensionale Metodo 2: ultracentrifugazione analitica.